到了公元前4世纪，希腊北边的马其顿王国崛起，打败其他城邦，成了希腊的盟主。公元前年，马其顿国王腓力二世建立了“泛希腊同盟”，准备团结希腊人，一起往东去打波斯。波斯王大流士三世（公元前—公元前年在位）吓得够呛，赶紧派出刺客把腓力二世给暗杀了。谁知，他杀了一个腓力二世，却把另一个更可怕的对手推上了台，那就是腓力二世的儿子亚历山大。亚历山大迅速整合老爹的旧部，把希腊各邦统一在一起。于公元前年春天率领3.5万精兵，开始了东征波斯之旅。
亚历山大的这场远征是战争史上的一个传奇，是欧洲人的一个荣耀，然而对波斯帝国而言，却是一个惨烈的悲剧，充分演绎了什么叫“兵败如山倒”。大流世三世也好，其他波斯将领、总督也好，纠集兵马去跟亚历山大对阵，那是打一仗输一仗。公元前年，小亚细亚全丢了。公元前年，地中海东岸、埃及丢了，波斯海*全完了。大流士三世心想，识时务者为俊杰嘛，他忍辱负重，向亚历山大求和，愿意割地赔款。谁知亚历山大不屑一顾：谁要你割地赔款？我要的是整个波斯，把你打趴下了，这些地啊款啊不全是我的？
公元前年10月，大流士三世率领剩下的波斯主力，在高加米拉（今伊拉克）和亚历山大的希腊联*决战。保守估计，波斯投入了近30万大*，而马其顿不到5万。但双方士兵的训练、装备、士气和将领的谋略都实在相差太远。波斯*早已是惊弓之鸟，因为害怕遭到马其顿*夜袭，竟然摆好阵势在战场站了一夜。次日早上，波斯*先拿战象和战车突击，都被马其顿*击溃。随后，波斯*两翼骑兵杀出，将亚历山大两翼压制得喘不过气来。亚历山大中央步兵则和波斯*步兵主力相持不下。
眼看着波斯*有了点胜利的希望，不料阵前忽然烟尘飞扬，亚历山大亲率两千精骑直插大流士三世的中*，波斯*队如波浪开裂般被敌*分隔。转眼间，亚历山大冲到大流士三世车前不远处，大喝一声，亲手投出标枪，戳死了大流士三世的车夫。波斯*听到国王车上的一声惨叫，还以为大流士三世被杀了呢，士气顿时跌落到谷底，纷纷溃退。希腊和波斯之间的这场规模最大的会战，遂以亚历山大的全胜而告终。此后，亚历山大很快占领了巴比伦城，以及波斯帝国的三个城市苏萨、波斯波利斯和埃克巴坦，单是缴获的金银财宝，据说就用了5千头骆驼和2万匹骡子来搬运。而可怜的大流士三世则被叛臣杀害。疆域空前的波斯第一帝国就此覆亡，立国前后多年。
大流士三世和亚历山大
大流士三世为人宽厚。高加米拉决战前，他曾向亚历山大写信，以长辈口吻劝他不要过于轻狂，表示愿意与亚历山大分地为王。亚历山大则冷酷地回答，你赶紧准备决战吧，这个世界容不下两个大帝。大流士三世没法子，只得祷告自己死后波斯被一个仁慈的征服者统治。大流士三世被叛臣刺伤后，又被紧追而来的马其顿士兵发现。临终前的大流士三世和马其顿士兵握手，请他转达自己对亚历山大的敬意。之后，亚历山大为大流士三世举办了盛大的国葬，把杀害他的叛徒五马分尸。
在波斯帝国庞大的国土之上，马其顿国王亚历山大娶了大流士三世的公主，然后继续追亡逐北，把波斯的领土全部收入囊中，更饮马印度河，建立起比波斯帝国更为辽阔的亚历山大帝国，领土大部分在亚洲，统治核心在巴比伦。希腊文明因而推广到了中、西亚各地。公元前年，一代雄主亚历山大因病去世，帝国顿时分崩离析。部将们一番混战，最后分裂成几大块：占据希腊、马其顿地区的卡山德王朝；占据中亚地区的塞琉西王朝；占据埃及地区的托勒密王朝等。此后年间，整个亚洲的中西部进入了“希腊化”的时代。
